domingo, 22 de enero de 2023

Ácidos nucleicos recombinantes

Trabajo #7


Nombre: Erika Malena Noboa Romo

Asignatura: Biología celular y molecular

Paralelo: S3-P5

Fecha: 22/01/2023

Tema: Ácidos nucleicos recombinantes

Desarrollo:

1. Ácidos nucleicos recombinantes naturales
La recombinación homóloga es un ejemplo de recombinación natural que tiene lugar en el ciclo celular para reparar los ácidos nucleicos, en este caso, el DNA de E. coli. Así pues, en esta bacteria, se identifica que  es necesaria la expresión de RecA para que se realice la recombinación homóloga, además se reconoce que, en E. coli existen dos vías de recombinación, la primera, incluye a la nucleasa RecBCD y es específica de la recombinación derivada de DSBs y la segunda, dependiente de RecFOR, que interviene en la reparación por recombinación de roturas en una sola hebra (1).




2. Ácidos nucleicos recombinantes artificiales
  • Tema: Tratamiento moderno de la hemofilia y el desarrollo de terapias innovadoras.
  • Objetivo: Diseño de FVIII recombinante de una cadena para tratamiento de la hemofilia A.
  • Gen o secuencia a clonar: Gen del factor VIII de la coagulación (gen F8): 186kb.
  • Enzima de restricción: Bcl I.
  • Enzima ligasa: DNA ligasa. 
  • Vector: Vector viral de tipo adenovirus asociado recombinante rAAV-Spark200.
  • Célula Receptora: Eucariotas de líneas celulares CHO, HEK 293 y BHK.
  • Mecanismo de transferencia o inserción del gen: Mecanismo de transfección.
  • Métodos de identificación de clones: Se identificó las proteínas recombinantes mediante:   
    • Cultivo libre de proteínas.
    • Medición de concentración plasmática de la proteína. (2)

Bibliografía:
1. Klaric JA, Glass DJ, Perr EL, Reuven AD, Towne MJ, Lovett ST. DNA damage-signaling, homologous recombination and genetic mutation induced by 5-azacytidine and DNA-protein crosslinks in Escherichia coli. Mutat Res [Internet]. 2021[consultado el 22 de enero de 2023]; 822(111742). Obtenido de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8288033/
2. Ruiz A. Tratamiento Moderno de la hemofilia y el desarrollo de terapias innovadoras. Investigación Clínica [Internet]. 2021 [citado el 22 de enero de 2023];62(1):73–95. Obtenido de: http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0535-51332021000100073#:~:text=El%20tratamiento%20moderno%20de%20la,manejo%20multidisciplinario%20de%20la%20condici%C3%B3n.

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